

从0. 5m1自然悬液中提取RNAs基因,并在含有10%丙烯酞胺凝胶板中电泳。凝胶以市售硝酸银试剂染色。在98.9% (94/95)轮状病毒阳性标本中可观察到RNA模式,长型RNA模式和短型RNA模式各占77.7%(73/94),22. 3%(21/94)。
虽然绝大部分短型和长型RNA的标本分别属于亚群I和d,但检出两株罕见的HRVO来自Nanyuki NK59标本所包含的A病毒已确定为亚群H血清4型、显示一条罕见的长型RNA,伴有一条附加带与RNA片段5,6联系,对于这个现象的一种可能解释是那个附加带表示为一组重组基因,它含有正常的RNA片段结合一个同类RNA片段的短碎片。对于NK59这个罕见RNA外形的另一种解释是该标本可能是两个HRV株互有相似的RNA模型的混合物,因为该株在细胞培养中分离不成功,所以不能证实这些假设;另一罕见株D202从I,D, H标本中检出是属于亚群B,但显示为短型RNA。
试图在MA-104细胞中分离所有RV阳性标本,有20株HRV(包括D202株)被检出,用繁殖株以EUSA法确定D202为血清1型,对于RV血清型如前述是以PCR法来证实。虽然已有报道带有罕见亚群和RNA模式的几个HRVs,但它们均属于带长型RNA的亚群I,带短型RNA的亚群H至今才检出。D202株检出可强化关于亚群特异性与RNA模式之间的关系无分子基础的假说。再者D202毒性似乎与普通HRV没有区别,因为该株是从有明显症状的7个月男婴分离的。人类轮状病毒VP4,其遗传与抗原性的分类已由Gorjiglia与同事将其分为三个不同型,即1型(又进一步分即1A,1B),2型和3型,而且HRV一个新的P血清型可由69M株表示。对于VP4抗原特征,分离株抗一VP4 MAbs S3-2C KU-lOC和K8-2C12的反应性,可以ELISA检测之。亚群I血清2型株(D205)仅与MAb S3-2C有反应,其余16株则与MAbs S3-2C和KU-1OC两者均有反应,无一分离株与MAb K8-2C12有反应,唯一K8株的VP4方能重现P血清3型。与这些MAbs反应所得到的上述结果表明,MAb S3-2C与属于P血清 1A, 1B和2的HRV株起反应,而KU-l OC则与P血清1A和2的HRVs起反应。因此,16个分离株包括D202均与S3-2C及KU-l OC有反应,可分类为VP4血清型1A或2、提示D202和VP4与带短型RNA的血清2型HRVS的抗原性不同,进一步的基因分析可能解释该罕见株的衍化现象。
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