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肯尼亚引起胃肠炎的人类轮状病毒的特征

     摘要通过抗原和基因分析对肯尼亚一个都市(首都内罗毕)和三个农村地区胃肠炎儿童的轮状病毒作了鉴定。这些属于亚群H和G血清I型抗原地方株为最常见株,但检出两株罕见株。一株(NK59:亚群H、G血清4型)在聚丙烯酞胺凝胶电泳具有一个附加RNA带,另一株(D202)亚群H和G血清I型则显示为短型RNA的抗原特异性,后者已适应生长于细胞培养中。

    全世界已公认A群人类轮状病毒(HRV)是胃肠炎的主要病原。HRV病毒颗粒包含有11个双股RNA片段并包被在双层衣壳中。根据RNA片段6编码的内壳蛋白VP6的抗原性,绝大部分A群HRVS可被转变为亚群I或I。具有传染性的颗粒的外壳包含两种中和抗原—VP4和VP7, VP7是RNA片段7, 8, 9的产物,标记G血清型的特异性,7个G血清型已能在HRVs中检出。相反,基因4的产物VP4则标记其他血清型的特异性,P(或VP4)血清型是从G血清型特异性中分离的。在HRV中至少有4个P血清型及1个亚型已有报道。在发展中国家进行HRV P和G血清型的调查是轮状病毒疫苗的重要准备,因为疫苗的VP4和VP7能诱导保护性免疫,又因为疫苗的效力取决于疫苗株与流行野型HRV株一致性。

    已有报道,HRV亚群的特异性与病毒RNA在聚丙烯酞胺凝胶电泳(PAGE)中迁移模式有着密切关系,属亚群1特异性的HRVS通过片段10和11的慢移大部分表示具有短型RNA的特征,属亚群B特异性的HRVS通过片段10和11快移则表示具有长型RNA特征,但是,例外株也能被检出,这些毒株的特征对HRV,的多样性提供有用的资料。

    应用抗原性和遗传基因标志对肯尼亚城市和农村地区的HRV、进行了分析。1989年2月-9月间,在内罗毕的肯尼亚国立医院的分院(传染病院I,D,H)收集住院的城市腹泻儿童粪便标本278份,其余144份粪便标本是1991年3月从Nanyuki, Kitui和Narok三个地区医院获得,这三个农村集镇分别位于内罗毕北,东、西约200km处。

    以磷酸盐缓冲液制成约15%粪便悬液,用碳氟化合物处理并以低速离心澄清,应用市售酶联免疫(EUSA)试剂盒检测粪便标本中A群轮状病毒抗原,HRV阳性标本则用日本Sap-poro医学院Taniguchi先生提供的亚群I、H特异的单克隆抗体的ELISA (MAbs)试剂盒进行亚群与血清型的测定;对G血清型1, 2, 3,4应用市售特殊的MAbs检测。

    内罗毕RV阳性率是33.8%(94/278),Nanyuki是35%(21/60),Narok是13.8%(4/29), Kitui是1.8%(1/56),小于12月龄的婴儿阳性率最高。来自标本79. 2%的足够材料可用作EUSA亚群检测和血清定型。粪便标本中81株((85. 3%)HRV被确定为亚群,4株(51.6%)可以血清定型。亚群B血清1型最为常见(28.4%),接着是亚群I和血清2型(13.7%)和亚群B血清4型(7.4%)。

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